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蛹虫草多糖对小鼠抗疲劳作用的研究

摘要 采用雄性ICR小鼠随机分组,分别灌胃蒸馏水、不同剂量的蛹虫草(Cordyceps militaris)多糖(低、中、高剂量组分别每天灌胃75、150 、450 mg/kg BW),40 d后建立疲劳模型,比较力竭游泳时间、肝肌糖原水平、乳酸含量和机体相关的乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶活力。
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时时彩平台哪个好 www.1otf.com.cn   摘要 采用雄性ICR小鼠随机分组,分别灌胃蒸馏水、不同剂量的蛹虫草(Cordyceps militaris)多糖(低、中、高剂量组分别每天灌胃75、150 、450 mg/kg BW),40 d后建立疲劳模型,比较力竭游泳时间、肝肌糖原水平、乳酸含量和机体相关的乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶活力。结果表明:高剂量蛹虫草多糖能够显著延长小鼠力竭游泳时间,中高剂量多糖显著提高小鼠肝肌糖原水平,有效的遏制运动后小鼠乳酸生成量,而低剂量多糖显著增加运动后小鼠乳酸脱氢酶活力,3个剂量的多糖均能提高运动后小鼠血清中超氧化物歧化酶的活力。
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  关键词 蛹虫草多糖; 抗疲劳; 力竭; 乳酸
  疲劳是机体在一定环境条件下,由于长时间或过于繁重、紧张的劳动而引起的工作效率暂时明显降低的一种生理病理现象[1],也是当今人群中最常见的一种亚健康表现。若疲劳不能及时消除或减轻,会进一步加重症状并诱发多种疾病。通过补充外源性活性物质可以很好的改善这一症状[2-4]。蛹虫草(Cordyceps militaris)又名北冬虫夏草或北虫草,隶属于子囊菌门、麦角菌科、虫草属[5],含有虫草多糖、虫草素、虫草酸等多种活性物质。中医认为,虫草入肺肾二经,既能补肺阴,又能补肾阳,主治肾虚,病后虚弱等。现代药理实验证明其具有抗肿瘤、提高免疫、抗病毒、抗氧化、保肝、延缓衰老等作用[6-9],而关于蛹虫草缓解疲劳的报道较少,王洪军等以血清激素为指标研究了蛹虫草提取物增强小鼠耐缺氧和抗低温疲劳的作用[10]。陈文冬等用蛹虫草粉对大鼠进行了类似的研究[11]。多糖为蛹虫草的主要活性成分之一,含量达到15.48%[12],因此笔者研究了蛹虫草多糖对运动后小鼠的能量储备、乳酸清除和抗氧化酶活力等的影响,以考察蛹虫草多糖对小鼠的抗疲劳作用,为蛹虫草的产品开发和深加工等应用提供参考。
  1 材料和方法
  1.1材料
  雄性ICR小白鼠96只,体重18~22 g,购自扬州大学比较医学中心,实验动物生产许可证编号:SCXK2012-0004。实验鼠颗粒饲料购自南京市江宁区青龙山动物繁殖?。ㄖ饕希河衩?、小麦、麸皮、花生饼、鱼粉、鱼肝油、鸡蛋、大麦、各种氨基酸、复合多维矿物质);蛹虫草子实体由江苏海安弘寿生物技术有限公司提供;糖原、乳酸(lactic acid, LD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。其它试剂均为国产分析纯。
  1.2方法
  1.2.1蛹虫草多糖制备
  蛹虫草子实体粉碎后用石油醚脱脂,60 ℃干燥至恒重,称取300 g,按料液比1∶30(w/v)加入蒸馏水,100 ℃提取3 h,离心(4000 g,15 min)后收集提取液,重复提取一次,合并两次提取液浓缩至400 mL,Sevag法脱蛋白,加入3倍体积95%乙醇沉淀,4 ℃静置过夜,离心(4000 g,15 min),收集沉淀物,冻干后备用[13]。
  1.2.2小鼠喂养
  将96只小白鼠随机分组并标记,共分为4组,每组24只,分别为:对照组、低剂量组(75 mg/kg BW)、中剂量组(150 mg/kg BW)、高剂量组(450 mg/kg BW)。对照组灌胃蒸馏水,实验组灌胃不同剂量的蛹虫草多糖,自由饮水饮食。28 ℃喂养40 d后参照《保健食品检验与技术评价规范》中的缓解体力疲劳的方法进行实验[14]。
  1.2.3小鼠力竭游泳实验
  末次灌胃30 min后在小鼠尾部各负荷体重5%的铅丝,放入50 cm × 40 cm × 40 cm、水温(28±2) ℃的水箱中游泳,直至小鼠的头部沉入水中,经10 s仍不能返回水面视为力竭。记录小鼠游泳开始至力竭时间作为小鼠的力竭游泳时间,每组8只小鼠。
  1.2.4全血乳酸测定(LD)
  在小鼠末次灌胃30 min及负重游泳20 min并休息15 min及60 min后,分别眼球取血,用试剂盒测定全血乳酸含量,每组8只小鼠。
  1.2.5LDH和SOD及肝肌糖原的测定
  末次灌胃30 min后,不负重的条件下游泳90 min,将小鼠捞出擦干,休息60 min后进行眼球取血、分离血清测定LDH和SOD活力。小鼠处死,解剖取肌肉和肝脏测定糖原含量,相关指标均按测定试剂盒中要求进行,每组8只小鼠。
  1.2.6统计分析
  所有实验数据用SPSS 17.0软件进行分析,均值间差异比较采用t检验,数据统计均以平均值±标准差(Mean±SD)表示,组间差异采用单因素方差分析,P < 0.05为有显著性差异,P<0.01为差异极显著。
  江海涛,等:蛹虫草多糖对小鼠抗疲劳作用的研究
  2 结果与分析
  2.1蛹虫草多糖对小鼠力竭游泳时间的影响
  图1结果表明,与对照相比蛹虫草多糖低、中剂量组对延长小鼠力竭游泳时间无显著作用,但高剂量组力竭游泳时间显著高于对照组,比对照组提高了20.5%(P<0.05)。
  2.2蛹虫草多糖对运动后小鼠肝、肌糖原的影响
  糖原是机体运动时的主要能量来源,糖原的储备情况影响着机体的体能。图2表明,蛹虫草多糖3个剂量组都能提高小鼠肝脏糖原的储备,中、高剂量组与对照组相比,差异极显著(P<0.01)。蛹虫草多糖中、高剂量组对小鼠肌糖原也具有极显著的提高作用(P<0.01)(图3)。
  2.3蛹虫草多糖对运动后小鼠全血LD及血清LDH的影响
  乳酸(LD)是机体运动过程中的代谢产物,过多的乳酸积累使机体产生疲劳感。图4表明,运动前各处理组小鼠乳酸水平没有差异(P>0.05)。负重游泳20 min后,各组乳酸水平较运动前有较大提高,其中对照组和低剂量组乳酸生成量显著高于中、高剂量组。在乳酸清除量方面,3个剂量组以低剂量更为明显,差异极显著(P<0.01)。乳酸的代谢依赖乳酸脱氢酶(LDH),从图5可知,低剂量组的小鼠运动后,乳酸脱氢酶的活力明显高于对照组(P<0.05),这也是低剂量组乳酸清除量较高的一个原因。   3 小结
  实验结果表明,给小鼠灌胃蛹虫草多糖后,高剂量组小鼠力竭时间较对照组显著提高(P <0.05),说明蛹虫草多糖可延长运动至疲劳的时间。力竭运动后,蛹虫草多糖中、高剂量组小鼠肝肌糖原的储量较对照组有了极显著的提高(P<0.01),表明提高机体糖原储备可能是蛹虫草多糖提高运动能力,延长小鼠力竭时间的原因之一。乳酸是运动过程中机体的主要代谢物质,乳酸的生产和及时清除影响着运动的效率。力竭运动后,中、高剂量组的乳酸生成量得到有效的遏制。低剂量组小鼠乳酸的清除量较对照组增加极为明显(P<0.01),这与低剂量组能有效提高小鼠机体乳酸脱氢酶活力有关。运动可以提高机体心肺机能,有益健康,但过度运动所产生的负面影响值得警惕,尤其是自由基,超出机体的清除水平时,会破坏生物大分子的结构,进而影响其功能[15]。蛹虫草多糖3个剂量均能显著提高运动后小鼠血清SOD活力(P<0.05),表明蛹虫草多糖对小鼠外周红细胞具有良好的?;ぷ饔?。
  参考文献
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